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實驗 bug 頻發(fā),這個移液錯誤你中招了嗎?
點擊次數(shù):419 更新時間:2022-08-19

「正確移液」聽上去像是每個實驗人早已學(xué)會的基本操作,但實際上:

● 每次打出液體后,吸頭內(nèi)還殘留了部分液體;

● 檢測實驗,加樣操作按標(biāo)準(zhǔn)來,但是卻總是污染;

● 處理樣本,提取 RNA/DNA 時,效率極低;

● 明明用的是全自動的移液工作站,但是移液卻不夠精確。

而造成這一切的「真兇」往往是最讓人忽視的存在——移液吸頭。

你一定在想:只要能裝上的吸頭就是能用的吸頭吧,其實不然,低質(zhì)量吸頭不僅會讓殘留的污染影響到樣品,大量液體殘留,還會造成移液誤差,很多科研人的實驗就敗在了這一步。如果移液器與吸頭匹配使用精確度不佳,會影響到移液系統(tǒng)的密封性以及精準(zhǔn)性。那么如何來挑選合適的耗材呢?大家在吸頭選擇上可以參考以下幾點:


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一、按照實驗需求,選擇吸頭類型和功能

● 當(dāng)樣品體積未知或不一致時體積不均一,檢測動物或環(huán)境液體樣本時(如血液,尿液,拭子,水質(zhì)等樣本),需要使用黑色導(dǎo)電吸頭。導(dǎo)電吸頭能檢測到其何時插入樣品,何時停止,防止過深插入樣品導(dǎo)致樣品溢出容器,污染整個工序;

● 當(dāng)樣本體積一致,且實驗無特殊需求時,選擇標(biāo)準(zhǔn)吸頭即可;

● 避免交叉污染或保護(hù),應(yīng)使用帶濾芯的吸頭;

● 防止實驗中的 RNA/DNA 被降解引起結(jié)果錯誤,應(yīng)該使用無 RNA/DNA 酶的槍頭;

●對于靈敏度要求高,或者易殘留的珍貴樣本時,應(yīng)該適應(yīng)低吸附吸頭,提升回收率。

二、吸頭準(zhǔn)確度判斷

良好的吸頭氣密性能夠保證工作站發(fā)出的指令被完/美執(zhí)行,是吸頭選擇的重點指標(biāo),可以通過吸取液體后懸停的方法,來判斷氣密性;

吸頭不能夠出現(xiàn)掛液現(xiàn)象,掛液會造成移液不準(zhǔn)確??梢酝ㄟ^試用的方式,進(jìn)行吸頭測試。

三、判斷吸頭的品質(zhì)

吸頭添加劑:吸頭在制作過程中會加入顯色劑、脫模劑等化學(xué)物質(zhì),添加劑越多對移液造成的影響就越大,因此需要選擇添加劑少的吸頭;

生物污染:槍頭需要保證對存在的生物污染都已經(jīng)處理干凈,吸頭生/產(chǎn)商應(yīng)該出具相應(yīng)的檢查報告,以確保對實驗不存在影響;

在選擇導(dǎo)電吸頭時,需要特別注意其導(dǎo)電性,導(dǎo)電性良好的吸頭才能準(zhǔn)確檢測液面,避免移液失敗和樣本污染。

 

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